Canon EF 75-300 mm f/4-5.6 III оборудован семилепестковой диафрагмой, которая обеспечивает естественное изображение объектов, находящихся вне зоны резкости. Минимальное значение диафрагмы равняется f/32-45. Оптическая схема Canon EF 75-300 mm f/4-5.6 III предусматривает 13 линз в 9 группах, угол изображения меняется по диагонали от 32°11’ до 8°15’ (соответственно для кадра 24х36 по вертикали 18°11’-4°35’, по горизонтали 27°-6°50’).
Помимо автоматической, Canon EF 75-300 mm f/4-5.6 III поддерживает и режим ручной фокусировки, однако для того, чтобы навести резкость вручную, фотограф должен перевести в соответствующее положение особый переключатель. Фокусировка осуществляется при помощи мотора постоянного тока. Система зумирования имеет очень плавный ход и практически застрахована от люфтов. Особого положения «Макро» у объектива нет, однако при фокусном расстоянии 300 мм возможна съемка с масштабом 1:4 (увеличение 0,25х), а поле изображения составляет 95х142 мм. Минимальная дистанция наведения резкости Canon EF 75-300 mm f/4-5.6 III равняется 1,5 м. Объектив может использоваться с опционными удлинительными кольцами EF-12 и EF-25.